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《重振中醫》 第818章 復方川貝消喉噴霧(完)

“這個實驗其實不不難,一共只分為兩步。”

“首先是聚合酶鏈式反應,即PCR擴增反應;第二步是酶切反應。”

張興運介紹道。

第一步,在PCR擴增反應部分,只需要跟著想要的結果,明確各種試劑和樣品的加量以及擴增條件,按照正常的要求作即可。

需要注意的是,吸取試劑時,一定要排盡氣泡,由于試劑的加量都非常小,滴加試劑時,常常出現試劑聚集在槍頭尖端,形一個小滴,難以滴下,可以將滴打到離心管壁上。

利用其與離心管壁的吸附作用力,將滴留在離心管

最后,再用無菌超純水補足3滴反應系后,將離心管蓋蓋好,至于離一t2機中,離心30秒,以使試劑、樣品和水在離心管底部充分混勻。

更有利于PCR反應的順利進行,可以大大增加擴增反應的功率。

至于酶切反應。

可以在滴加實驗一得到的結果后,再滴加適量BSA,它是一種酶切反應催化劑,能夠使酶切反應進行更徹底。

酶切效果更好:通常試劑一與BSA的積比約為1:2。

“我們在在川貝母的PCR鑒別試驗中,SmaI加量為0。5斗l,BSA的加量為1斗。滴加BSA后,酶切反應的系仍為20斗,所以無菌超純水的加量要相應減。酶切反應的條件應設置為30,反應2h。”張興運說道。

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陳浩然還是沉默。

但這種沉默已經代表了一種態度。

不贊同,不拒絕。就靜靜的看著,即便你作死也好,即便你仙也罷,他都這麼靜靜的看著。

當然,實驗室里面的實驗還在繼續。

“電泳檢測酶切反應完后所得到的溶。得到的結果是?”楊問道。

“含有標準規定的長度在100~250bp的兩條DNA條帶,需要用瓊脂糖凝膠電泳法進行檢視。”終于回答道。

走到這一步,實驗的還在繼續。

但至并沒有再提出什麼質疑。

鐘醫和楊還是按照實驗步驟再進行,首先,需要制膠和配制電泳緩沖,制膠用緩沖和電泳緩沖應保持一致,用百分之1的TAE或TBE即可。

“注意,在制膠過程中注意做好防護,切勿燙傷。”鐘醫提醒道。

“假好心。我會出事?”楊沒氣的說道。

兩人,待膠溶溫度下降至60℃左右時,滴加量GelRed,振搖混勻后緩慢傾倒人好梳子的膠槽中,他們盡量不產生氣泡,以免影響電泳效果。

待膠凝固并冷卻至室溫后。即可將其轉移至電泳槽中,準備電泳。

下一步,兩人依次將樣品、對照藥材、空白對照加膠孑L中。

特別小心,手十分穩,沒有破膠孑L邊緣或穿膠孔底部。以免影電泳效果。

“他們現在再加加樣緩沖,這樣做主要是兩個作用。”

“一方面其度較大,可使樣品沉積在膠孔底部,避免樣品上浮外溢,保障電泳條帶湊,防止擴散。”

“另一方面,其中添加染劑。可以在電泳過程中指示前沿。電泳結束后。可將凝膠置于凝膠像儀上進行檢視。”

張興運說道。

而楊這麼一路實驗坐下來,正如張興運在報告之中所寫的那樣。

在與對照藥材凝膠電泳圖譜相應的位置上,在100~250bp應有兩條DNA條帶,空白對照無條帶。

只有一點有點問題。

“為什麼其中有一條條帶中出現彌散的況?”楊的問道。

“出現彌散的原因只可能兩種。”鐘醫想了想回答道:“一方面可能是制膠所用緩沖與電泳緩沖不一致,應保持一致。另一種,可能是電泳緩沖長期未更換,緩沖鹽濃度變化,或緩沖被污染,應及時更換緩沖。”

鐘醫的回答打消了楊的疑

實驗做到這兒,楊也明白了,鐘醫沒有撒謊,張興運的報告百分之百真實。

整個實驗的難點就在于酶切反應。

但是兩人都是實驗室的好手,自然不會因為這一點小問題出問題。

“現在華夏有什麼重要是用了分子生學技在中藥鑒定方面嗎?我說的是已經有標準的。”楊問道。

“目前僅有蘄蛇、烏梢蛇的分子生學鑒別收我國醫藥中標準,分別采用了PCR和聚合酶鏈式反應-限制片段長度多態鑒別方法。還有就是我們剛剛做的川貝了。”鐘醫回答道。

是的,分子生學技在中藥鑒定方面的應用方興未艾。

這是一場危機,也是一個機遇。

就如同DNA條形碼方法在中藥材鑒定方面取得較好的效果一樣。

中藥鑒定道阻且長,需要經驗鑒別、分子生學技、理化鑒別和顯微技的共同合作。UU看書 www.uukanshu.com才能真正實現中藥材和飲片的明確鑒定,才能保障中藥和中醫產業的長足發展。

“我無話可說,我這邊讓你們過了。”楊擺了擺手說道。

是的,從科學上,從實驗上,從藥理上,楊都無話可說。

在鐘醫的指導下,楊的這個研究嚴到不可思議的一個地步,讓人想要從中早一點什麼錯誤出來都特別的難。

聽到楊這麼說,外面已經傳來了抑不住的歡呼聲。

“張興運醫生這也太強了吧。他不是中醫嘛,竟然也能讓楊啞口無言。”

“廢話,只要道理還是那個道理,那麼掌握真理的人一定不怕什麼的。”

“我們贏了嗎?這一局我們贏了嗎?”

“看來真理還是站在我們這一邊的。”

中醫院的眾人已經按捺不住喜悅了,紛紛的笑了起來,說話的聲音都開始變大了。

這還不是重頭戲。

幾大藥廠那邊也在頭接耳,像是在商量著什麼,雖然不知道他們小聲在說些什麼。不過從他們眼神中流出的,也能夠看出他們的目的了。

“我們哈市對這個藥志在必得啊。你們不知道,我們一到冬天就容易出現這些狀況,現在有一個藥這麼好……”紀建同說道。

“等等。我們滬市可不會讓啊。”范樂生也連忙打斷了紀建同。

這才開始,藥廠就已經爭了起來。

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